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如何對包涵體蛋白進行表達與復性

關于包涵體的復性一直是生物制藥的瓶頸，包涵體的處理一般包括這么幾步：菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復性以及純化。一、包涵體蛋白的表達在平板上挑取單菌落，接種于含有氨芐青霉素和卡那霉素抗性的5mlLB培養(yǎng)基中，37℃過夜培養(yǎng)，然后轉(zhuǎn)接到100mlLB培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)至A600為0.4~0.6時，加入IPTG至終濃度為0.5mmol/L誘導3.5h。8000r/min離心5min收集菌體，加入10ml50mmol/LTris-HCl，冰浴下超聲波破碎后12000r/min離...

多克隆抗體制備的常見問題解析

多克隆抗體制備能識別出與免疫原蛋白具有高同源性的蛋白，或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白，例如當未測試物種中的抗原性質(zhì)未知時，有時會使用多克隆抗體。可識別多個結構域，即使原始抗原的一些空間結構或者序列發(fā)生小變化或者部分抗原決定簇變化，仍可以識別抗原，因此有更大的適應性。多克隆抗體制備的常見問題解析：1、免疫動物該如何選擇？選擇宿主動物時，一般要考慮兩個問題：（1）免疫效果能否保證。特別是對于蛋白抗原的情況，為了保證免疫成功，就要求宿主動物與抗原來源物種之間有較遠的親緣關...

雙特異性T細胞銜接抗體

雙特異性抗體（bispecificantibody,BsAb）,擁有兩個不同的抗原結合位點，從而同時與兩個靶抗原結合，在發(fā)揮抗體靶向性的同時，介導另外一種特殊的功能，例如一個結合靶細胞上的特異抗原，另一個結合淋巴細胞或者吞噬細胞等效應細胞，從而在腫瘤診斷及治療過程中發(fā)揮傳統(tǒng)抗體**的優(yōu)勢。作為最新應用的BispecificTCellEngager(BiTE)與傳統(tǒng)抗體相比在組織滲透率、殺傷腫瘤細胞效率、脫靶率和臨床適應癥等指標方面具有較強的競爭力，臨床應用優(yōu)勢顯著。特別在使用...

安諾倫代理Detroit R&D品牌——用于心血管疾病和癌癥的研究

DetroitR&D,Inc.成立于1997年，由HyesookKim博士創(chuàng)立，致力于通過jianduan技術提供最高質(zhì)量的產(chǎn)品，與研究界建立信任關系。底特律研發(fā)一直穩(wěn)步建立自己作為一個世界范圍內(nèi)的新型診斷和藥物篩選產(chǎn)品的來源。DetroitR&D研發(fā)實驗室和辦公室位于密歇根州底特律市一個新的再開發(fā)區(qū)的中心。DetroitR&D研發(fā)公司的原始項目旨在開發(fā)簡單廉價的高血壓試劑盒，用于測量血液，尿液和組織中的新型脂肪酸生物標志物，現(xiàn)已發(fā)展成為一家在高血壓，中風，心血管疾病和糖尿病...

支原體污染細胞后清除支原體常用方法有哪些？

1）對于非重要的細胞，如培養(yǎng)中的細胞、WCB的細胞等，將培養(yǎng)物與用過的培養(yǎng)基滅活后丟棄即可。對于較為重要的細胞，如來源珍貴或?qū)嶒炇抑屑毎２亓枯^小等可以采用以下（2）-（8）的方法。2）動物體內(nèi)接種除菌法：把受支原體污染的腫瘤細胞接種在同種動物皮下或腹腔中，借動物免疫系統(tǒng)消滅支原體，而腫瘤細胞卻能在體內(nèi)繼續(xù)生長，待一定時間后，從體內(nèi)取出細胞再進行培養(yǎng)繁殖。3）用清洗純化法清除支原體污染的方法：細胞營養(yǎng)馴化→優(yōu)質(zhì)細胞群的篩選→細胞清洗→反復離心洗滌，其原理是利用離心力、細胞、微...

單克隆抗體/雜交瘤細胞定制服務

雜交瘤技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經(jīng)抗原免疫的免疫動物脾細胞（如小鼠B淋巴細胞）和具有永生功能的腫瘤細胞（如小鼠骨髓瘤細胞）。被特異性抗原免疫的免疫動物脾細胞（B淋巴細胞）的主要特征是它的抗體能夠分泌產(chǎn)生結合抗原特定位置（表位）的抗體，但其自身不能在體外連續(xù)培養(yǎng)，具有永生功能的腫瘤細胞（骨髓瘤細胞）則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖，即具有所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下，只有由一個B淋巴細胞與一個骨髓瘤細胞融合的雜交瘤細胞才能具有持...

關于細胞培養(yǎng)基的問題

一、為什么你公司液體培養(yǎng)基1640顏色發(fā)黃，是pH值不對嗎？不是。因為配方原因，1640為堿酚紅型，其中酚紅的濃度只有DMEM的四分之一，所以是因為酚紅濃度低，而非PH值低。二、液體培養(yǎng)基可以放-20℃保存嗎？不可以！因為在-20℃下，培養(yǎng)基中的鹽容易析出，培養(yǎng)基融化后，有的鹽可能無法重新溶解，從而導致培養(yǎng)基滲透壓降低，培養(yǎng)細胞時，細胞容易破裂而死亡。三、為何培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中，顏色會偏暗紅色，且pH值越來越偏堿性？培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出，造成...

全人源單抗制備 簡介

艾柏森生物提供基于全人源噬菌體抗體庫的全人源抗體篩選服務。單克隆抗體藥物發(fā)展經(jīng)歷了四個階段，分別為：鼠源性單克隆抗體、嵌合性單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人源化單克隆抗體，在第一個階段中，鼠源單克隆抗體是用老鼠制備的普通單克隆抗體藥物，但它毒副作用明顯，常引起人體的不良反應，大大制約了其在臨床實驗及相關應用領域的發(fā)展，而在單克隆抗體市場，第四個階段的全人源化單克隆抗體是其未來的發(fā)展方向。全人源化單克隆抗體與人體結合性最好，也是安全和有效的單克隆抗體。★技術服務內(nèi)容：1.基于...