雜交瘤技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免疫的免疫動物脾細胞（如小鼠B淋巴細胞）和具有永生功能的腫瘤細胞（如小鼠骨髓瘤細胞）。被特異性抗原免疫的免疫動物脾細胞（B淋巴細胞）的主要特征是它的抗體能夠分泌產生結合抗原特定位置（表位）的抗體，但其自身不能在體外連續培養，具有永生功能的腫瘤細胞（骨髓瘤細胞）則可在培養條件下無限分裂、增殖，即具有所謂永生性。在選擇培養基的作用下，只有由一個B淋巴細胞與一個骨髓瘤細胞融合的雜交瘤細胞才能具有持續培養的能力，形成同時具備抗體分泌功能和保持細胞永生性兩種特征的細胞克隆。理論上，我們認為一個免疫后的B淋巴細胞只分泌產生一種抗體，而一個雜交瘤細胞只包含一個B淋巴細胞，所以增值后的雜交瘤細胞均來自一各克隆，因此產生的抗體就是單克隆抗體。

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